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庞志峰 章光明 朱淑英 张兵 唐慧玲
摘要：【目的】了解金华市自然人群肺炎支原体（MP）感染率及抗体水平，为该疾病的防治提供依据。【方法】采用分层随机抽样方法，采集1560名研究对象血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定肺炎支原体特异性抗体。
【结果】1560名调查者中，MP抗体阳性1000名，阳性率为64.1%，GMT为1∶60.3。不同地区、不同户籍、不同性别人群MP抗体水平无差异。3月、6～9月所采集标本抗体水平较高。不同年龄段抗体水平呈现“中间高、两头低”的现象，儿童和青少年的抗体水平相对较高。【结论】金华市MP人群感染率较高，防控工作需要加强。
关键词：肺炎支原体；抗体；流行病学；酶联免疫吸附试验
中图分类号：R375+.2 文献标志码：A DOI：10.19428/j.cnki.sjpm.2018.18359
肺炎支原体（MP）感染又称原发性非典型肺炎、冷凝集试验阳性肺炎，基本病理呈间质性肺炎或毛细支气管炎样改变，临床表现以顽固性剧烈咳嗽为特征。MP除引起肺部病变外，还可以引起支气管炎、扁桃体炎、鼓膜炎，并且可引发中枢神经系统、血液系统病变，严重者可导致死亡[1]。为了解金华市自然人群MP感染状况，2014—2015年该市疾病预防控制中心（CDC）开展了自然人群MP血清流行病学调查，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 对象
采用分层随机抽样方法，在金华市9个县（市、区）内随机抽取东阳市、永康市、金东区和浦江县4个县（市、区）为研究地区，每个县（市、区）按经济发展水平分别随机抽取3～4个乡镇（街道）开展调查。根据2013年金华市一起MP肺炎暴发疫情处置过程中健康人群（病例对照研究中社区对照）抗体检测结果，设置金华市人群MP抗体阳性率π为30%，容许误差δ为2.5%，检验标准α为0.05，估算样本量为1200人。研究对象纳入标准：根据临床呼吸道感染症状标准，剔除任何患有与呼吸道感染相关疾病者，将符合研究标准的人群按照户籍分为本地和流动两组，分0月[KG-*4]～、8月[KG-*4]～、2岁[KG-*4]～、4岁[KG-*4]～、6岁[KG-*4]～、8岁[KG-*4]～、10岁[KG-*4]～、15岁[KG-*4]～、20岁[KG-*4]～、30岁[KG-*4]～、40岁[KG-*4]～、50岁[KG-*4]～、60岁[KG-*4]～13个年龄段，每个年龄段调查不少于30人。调查期限为2014年10月—2015年9月，为减少因采样时间带来的误差，每个县（市、区）每月按比例完成各年龄段的采样。
1.2 方法
1.2.1 样本采集 由经过培训的调查员说明调查目的，经调查对象或监护人现场签署知情同意书后，<8岁者采集静脉血2 mL，≥8岁者采集静脉血5 mL，分离血清后置于-70℃冰箱保存，并送金华市CDC统一检测。
1.2.2 检测方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定肺炎支原体特异性抗体（IgG、IgM、IgA），检测试剂由富士瑞必欧株式会社生产。检测前行预实验，待实验结果稳定后再对所有血清标本进行检测，抗体滴度≤1∶20判为阴性，>1∶20判为阳性。为减少实验误差，全部检测工作由2人按照各自分工完成。
1.2.3 统计学分析 使用EpiInfo 7.2软件建立数据库并进行数据的双录入和统计分析。计数资料以相对数表示，采用描述流行病学方法，按性别、地区、年龄组、户籍及月份统计血清抗体阳性率和几何平均滴度（GMT）进行比较分析。率的比较用卡方检验，抗体滴度经对数转换后进行t检验、F检验或秩和检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 基本情况
共调查1560人，每个县（市、区）390人，每个年龄段每县（市、区）调查30人，每个月采集标本120～150份。男性777人，女性783人，性别比为1∶1.01；本地户籍924人，外地户籍636人。经统计，1560名调查者中，MP抗体阳性1000名，阳性率为64.1%（95%CI：61.7～66.3%），GMT为1∶60.3（95%CI：1∶56.8～1∶64.0）。
2.2 不同地區人群抗体水平
东阳市、永康市、金东区、浦江县调查人群MP抗体阳性率分别为62.6%、66.2%、65.1%和62.6%（χ2=1.694，P=0.638），GMT分别为1∶62.2、1∶61.0、1∶61.0、1∶57.1（F=1.995，P=0.053），不同地区人群MP抗体水平的差异无统计学意义。见表1。
2.3 不同户籍人群抗体水平
本地人口和外地人口MP抗体阳性率分别为65.0%和62.7%（χ2=0.872，P=0.351），GMT分别为1∶60.4和1∶60.2（t=-0.104，P=0.917），不同户籍人群MP抗体水平的差异无统计学意义。见表2。
2.4 不同性别人群抗体水平
男女MP抗体阳性率分别为62.4%和65.8%（χ2=1.906，P=0.167），GMT分别为1∶57.5和1∶62.9（t=-1.584，P=0.113），男女MP抗体水平的差异无统计学意义。见表3。
2.5 不同年龄人群抗体水平
图1显示，不同年龄人群抗体水平差异有统计学意义（χ2=2.383，P=0.017），MP抗体水平自新生儿开始随着年龄的增长逐渐升高，4～5岁时达到高峰，随后缓慢下降，在20～29岁出现一个低谷，30～39岁年龄段时再次升高并出现另一个高峰，但峰值低于4～5岁年龄段，40岁之后呈现逐渐下降的趋势。
2.6 不同采样月份人群抗体水平
不同采样月份MP抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=3.73，P=0.0002），其中3月份和6月份最高，其次是9月份、7月份和8月份。见表4。
3 讨论
MP是社区获得性肺炎（CAP）的重要病原体，高达40%以上的CAP由MP造成，其中多达18%的儿童病例需要进行住院治疗[1]。MP主要通过呼吸道传播，开展其血清流行病学研究，掌握其流行特点和规律，对预防和控制其传播有着积极的作用。目前，国内外关于MP血清流行病学的研究多集中于患病人群，有关自然人群MP血清流行病学的研究较少。2014—2015年金华市调查发现，该市自然人群MP抗体阳性率为64.1%，低于俞苏蒙等[2]报道的新入伍青年91.2%的阳性率，但高于林国跃等[3]报道的某部队战士35.8%的抗体阳性率、黄光明等[4]报道的汕头市健康人群11.8%的抗体阳性率和汪宁等[5]报道的南京地区健康儿童14.6%的抗体阳性率。产生这种差异的原因主要与研究人群的构成不同，另一方面也可能与所使用的检测试剂不同有关，血清MP抗体检测方法有多种，其标记物和方法不同都直接影响结果的敏感性和特异性，目前国内尚无统一的MP血清流行病学调查方法，对抗体阳性滴度的判断标准也不一致，这直接影响到对MP流行病学的现状研究和资料间的横向比较[1-2]。对于MP血清流行病学调查所使用的检测方法和试剂有待进一步规范，以使调查结果准确可靠且易于比较。
本次调查结果显示，不同地区、不同户籍、不同性别人群的MP抗体阳性率及抗体平均滴度的差异无统计学意义，说明人群具有同样的感染机会。不同年龄段人群MP抗体水平存在较大差异，呈现“中间高、两头低”的现象，与黄海樱等[6]报道结果相一致。在婴幼儿时期由于细胞免疫系统未发育成熟，T淋巴细胞功能低下，其对B淋巴细胞分泌抗体的调节功能也受到影响，此时为隐匿性感染，体内产生的特异性抗体效价较低；随着年龄的增长免疫系统逐步完善，当再次感染MP时，表现出肺炎等症状，特异性抗体水平也逐渐升高[6-7]；有研究表明，成年人感染MP后的IgG反应较弱，再次感染并不能使MP抗体水平明显升高，而且随着年龄的增长MP抗体水平也会自然递减，成年期之后MP抗体水平的下降可能与此有关[8]。
MP感染一年四季均有散发，不同地域的气候，包括气温、湿度等条件均会影响其流行曲线[1]。本研究结果显示，3月及6～9月金华市人群MP抗体阳性率和抗体平均滴度均高于其他月份，考虑可能与以下原因有关：① 金华市3月份降雨多，天气阴冷潮湿，利于MP生长繁殖；② 金华市为盆地地形，亚热带季风气候，6～9月天气炎热，空调的使用增加了MP人际传播的机会。
（志谢：感谢东阳市、永康市、金东区、浦江县疾病预防控制中心对本研究工作的支持）
参考文献
[1]李立明，曹务春，段广才，等.流行病学（第二卷）[M].3版.北京：人民卫生出版社，2015：550-559.
[2]俞苏蒙，陈林，叶晓波，等.健康青年人群肺炎支原体血清流行病学调查[J].实用预防医学，2013，20（10）：1199-1201.
[3]林国跃，张和平，杨震，等.某部队212名献血员肺炎支原体和衣原体感染的血清學调查[J].中华流行病学杂志，2005，26（12）：950.
[4]黄光明，黄从明，黄宜柱，等.汕头市健康人群肺炎支原体血清流行病学调查[J].广东卫生防疫，1995，21（4）：40-42.
[5]汪宁，赵季文，徐萃瑜，等.南京地区健康儿童青少年中肺炎支原体自然感染状况的调查[J].中国公共卫生，1990，6（12）：537-538.
[6]黄海樱，陈波，周强，等.广州地区不同人群肺炎支原体感染的流行病学调查分析[J].中华医院感染学杂志，2015，25（2）：300-302.
[7]李新，贾志杰，垢敬.肺炎支原体感染血清学检测分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（14）：1584-1585.
[8]AUBERT G，POZZETTO B，HAFID J，et al.Immunoblotting patterns with Mycoplasma pneumoniae of serum specimens from infected and non-infected subjects[J].J Med Microbiol，1992，36（5）：341-346.
（收稿日期：2017-05-22）
