供应女性 脾肾阳虚的 症状 追
郑洁+曹泽标+朱莹
摘要：目前，“病证结合”理论已在实验动物模型的建立与评价中被广泛运用，基于该理论，采用复合法建立的溃疡性结肠炎脾肾阳虚证动物模型，在宏观表征上要求突出“病”与“证”两者的特点，同时结合微观生物学指标及以方测证对模型进行综合评价。但该病证结合模型在建立与评价过程中凸显的病证关联性不强、模型多重性、评价标准局限等问题阻碍了其进一步发展。因此，进一步改进该模型建立及评价体系，对溃疡性结肠炎脾肾阳虚病证结合动物模型的完善有着十分重要的意义。
关键词：溃疡性结肠炎；脾肾阳虚；病证结合；动物模型
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.06.005
中图分类号：R228 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）06-0016-03
Abstract： Theory of “combination of disease with syndrome” has been widely used in the establishment and evaluation of experimental animal models. The ulcerative colitis animal models with spleen-kidney yang deficiency pattern were established based on the theory according to complex factors. These models were not only required to show the features of “disease” and “syndrome” at the macro characterization， but also combined with microscopic biological indicators and prescription test so as to make comprehensive evaluation. But the problems in the establishment and evaluation of “combination of disease with syndrome” models hindered further development， such as the weak connection between disease and syndrome， multiplicity of models， and limitations in evaluation standards. Therefore， further improvement in the establishment and evaluation of models will make great sense to better ulcerative colitis animal models with spleen-kidney yang deficiency pattern.
Key words： ulcerative colitis； spleen-kidney yang deficiency； combination of disease with syndrome； animal models
溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种病因尚不十分清楚的直肠与结肠慢性非特异性炎症性疾病。该病多呈反复发作，病程缠绵，治疗难度大，复发率高，具有一定的癌变率，被世界卫生组织列为现代难治病之一。中医认为，本病日久伤阳，脾肾阳虚是UC反复发病的根本病机，且贯穿整个发病过程[1]。临床上，中医药在治疗UC方面具有自身的特色与优势，但中医实验动物模型的不足使中医证候本质研究遭遇瓶颈。为适应中医辨病辨证相结合的临床实际，建立病证结合动物模型日益受到关注，并逐渐成为中医实验动物模型发展的新方向。为此，笔者就相关问题探讨如下。
1 “病证结合”理论在动物模型中的运用
“病”与“证”是不同医学体系中的两个概念，是分别从不同角度对疾病的认识，“辨病”是西医特长，“辨证”则是中医的优势。所谓病证结合动物模型，是指在中医药理论指导下，适当结合现代医学理论与实验动物科学知识，分别（或同时）采用传统中医学病因复制证候动物模型和采用现代医学病因复制疾病动物模型，令动物模型同时具有疾病与证候特征。病证结合的实质是西医的“病”和中医的“证”相结合，由于融合了现代医学病理学模型和中医证候模型两方面共同的因素和特点，使模型动物同时具有西医疾病和中医证候特征。
目前常用的病证结合动物模型制作方法有3种：①在中医传统病因造成相应的证候动物模型基础上建立疾病模型；②在建立疾病动物模型的基础上再施以中医病因造成相应的证候；③对疾病动物模型进行辨证建立的病证结合动物模型[2]。结合临床实际及科研基础，无论选用哪种方法，疾病和证候的双重特征必须在病证结合动物模型中得以反映。陈氏[3]在采用耗气破气法加饥饱失常法联合建立脾虚证小鼠动物模型的基础上再施予醋酸法复制胃溃疡动物模型，通过该复合因素造模制成病证结合的动物模型。杨氏等[4]先通过对大鼠进行一次性气管内博来霉素滴入复制肺纤维化模型，在此基础上再予每日灌胃腺嘌呤建立肾阳虚证模型，从而建立起同时具备肾阳虚和肺纤维化特征的肾阳虚肺纤维化大鼠模型，并在模型建立后通过四诊表现以及血肌酐、尿素氮、皮质醇和肺肾病理改变等综合评价该病证结合模型。
目前，病证结合建立的动物模型还缺乏合理的评价标准和评价方式，大部分学者在陈氏[5]提出的证候动物模型的诊断依据基础上予以总结，普遍趋于如下认识。①着重症状和体征：中医强调“辨证论治”，其中“证”的判定是基于中医“四诊”资料的采集，证候模型研究同样应遵循中医辨证的临床思维程序，只有动物被诱导出与人体某一特定的证候相同的特征表现，才能被认为是某一证候动物模型。如田氏等[6]认为，局限于当前科学技术水平，证候表征背后的生物学基础或病理生理依据并未被透彻挖掘，建立证候模型应注重以动物体表特征为模型评价的依据，再进一步探讨其生物学物质基础。因此，挖掘动物身上具有诊断意义的信息特征，寻找四诊范围内人和实验动物的联系和相似性，对模型进行恰当的辨证诊断以及建立证候模型评价指标体系有着十分重要的意义。②结合实验室指标：疾病证候的存在，必然有其赖以确立的关键物质基础，因此，科学精确及微观量化的现代分子生物学客观指标在一定程度上可为病证结合模型评价的客观化提供支持，但限制于目前科研水平，这些客观指标往往只能片面反映模型的生物学物质变化，故现阶段通常被当作模型评价中的辅助指标。③重视药物反证：鉴于“有是证用是方”思路，结合方证相应理论，采用药物反证，通常选用临床上常用且疗效确切的经典方药，以方测证，通过对证候模型的佐证判别来衡量该模型是否成功，从而加强病证结合模型建立的合理性和科学性。
总之，基于“病证结合”思想，实验动物模型从单纯的证候模型及疾病模型，向病证结合模型发展，为研究现代医学疾病及中医证候的本质创造了更好条件，对深层次研究和探讨中医药防治相关病证具有重要意义。
2 溃疡性结肠炎脾肾阳虚证病证结合动物模型建立与评价
当前针对UC病证结合动物模型，研究较多的是肝郁脾虚证模型及脾虚证模型，脾肾阳虚型则较少。笔者在查阅众多文献资料后，发现真正为该模型设计建立方案并予以评价的文章寥寥可数。就模型研究思路而言，大体的理论体系已形成，现在的病证结合模型都是建立在相应“病”和“证”存在的基础上，UC脾肾阳虚证动物模型也不例外。单从UC“疾病”动物模型而言，目前在实验模型研究方面已较为成熟，建立模型有多种方法，如免疫法、化学法、复合法以及基因模型等，其中三硝基苯磺酸-乙醇复合法通过对结肠黏膜屏障的损害与免疫调节失衡原理造模，是目前较为公认的UC经典造模方法。模型建立后再从表征、病理组织形态学和生化指标等方面进行验证及评价。同时，“脾肾阳虚”证候模型则是基于中医基础理论指导，在脾阳虚证、肾阳虚证模型基础上进行组合。其在造模方法上既有中医传统病因（苦寒泻下、寒湿伤阳、过食肥甘、饥饱失常等），同时综合现代医学研究，即通过外源性糖皮质激素（如氢化可的松等）、腺嘌呤、硫脲类等药物影响肾上腺皮质轴、甲状腺轴、性腺轴等靶腺轴负反馈调节途径，使动物体内的激素代谢紊乱。所研制的动物模型能较好模拟脾肾阳虚证的临床表现（大便溏泄、消瘦、食欲下降、体质量减轻、畏寒聚堆、弓背蜷缩等），建模后再根据中西医理论选择相关性好、特异性强的客观生化指标进行检测，从而系统综合评价所建立模型的科学性及合理性。如朱氏等[7]采用番泻叶煎剂灌胃+氢化可的松颈部皮下注射联合2，4-二硝基氯苯-乙酸法建立慢性UC脾肾阳虚型大鼠模型，通过大鼠行为学、宏观表征、病理组织形态学评分及光镜评估模型成功率。实验表明，该模型的表征及溃疡炎症类似人慢性复发性、持续性UC脾肾阳虚型的改变。许氏等[8]通过采用灌服大黄水煎液+肌肉注射氢化可的松并结合2，4，6-三硝基苯磺酸加乙醇灌肠复合建立UC脾肾阳虚型大鼠模型，在此基础上通过相关药物干预，以探讨该药物治疗脾肾阳虚型UC的作用机制。
总之，目前UC脾肾阳虚证病证结合动物模型建立方法多采用在脾肾阳虚证候模型基础上再施加UC疾病模型诱导因素，通过该复合因素法建立的模型能较好地体现“病”与“证”各方面的特征。笔者认为，虽然人为干预因素在一定程度上会影响模型的可靠性，但与单纯的疾病或证候模型比较，这种模型更加接近中医辨病辨证的临床实际；同时，采用复合因素法造模是今后中医动物模型发展的趋势，并将具有更加广阔的应用前景。在模型评价方面，目前研究多数将证候和疾病各自两套评价标准整合在同一动物上，这种评价方法是最常用，也是有一定根据和理论支撑的。UC脾肾阳虚证模型在宏观表征上必须要求突出“溃疡性结肠炎”与“脾肾阳虚证”各自的特征表现；在微观指标上既要展现UC病理结肠组织的镜下损害及血清生化检测对炎症反应的标示，也要通过目前比较公认的血清D-木糖、血清皮质醇等相关性及特异性强的实验室指标来为证候模型评价的客观化提供支持；最后，选择临床上常用且疗效确切的经典方药（如四神丸等），通过药物的反证衡量该模型是否成功是必要的标准，其对证候模型的判别佐证起关键作用。
3 对溃疡性结肠炎脾肾阳虚证“病证结合”动物模型的思考
基于已有研究基础上并结合自身实验经验，笔者认为，UC脾肾阳虚病证结合模型的建立及评价体系还存在诸多亟待解决和完善的问题，这些问题同样是其他病证结合模型面临的难题。将疾病模型与证候模型简单相叠加建立的复合模型，忽视了疾病与证候之间的关联性，故建模时应以两者在临床上的结合点为基础。如UC与脾肾阳虚证型的结合点体现在免疫方面，研究显示，免疫因素在UC发病机制中占重要地位[9]，而脾肾阳虚证型则多表现机体免疫功能低下及紊乱，故建议通过该思路寻找与两者联系紧密且特异性强的免疫因素复合模型，不仅可让该模型病证紧密结合，更可从本质上真实反映病证结合的内涵；同时，建模过程中采用化学药物、物理及机械性刺激方法等人为干扰因素，使动物模型表现出的是药物干预后的毒性反应或机械损伤，虽然客观指标符合相应疾病和证候的外在表现，但动物体内的机能状态和病理生理可能已发生较大变化，从而大大降低模型可靠性[10]。就UC脾肾阳虚证模型而言，氢化可的松、腺嘌呤等都是通过药物不良反应诱导造模的，其肝肾功能损害难以避免，从而导致模型建立后可能会向肾炎、肾衰竭等方向发展，即模型的多重性；另外，目前病证结合动物模型缺乏合理的评价标准体系是不争的事实，“病”与“证”各自局限的两套指标的简单相加貌似两者兼顾，实则未挖掘出二者结合后的本质特征及其内在联系。临床上，疾病的发生伴随着证候的动态及阶段性的变化，可见“病”与“证”几乎是同时进行并发展的，因此两者作为一个整体时所体现的指标变化才是临床上的论治点。鉴于病证结合模型多采用复合法先后建立而成，这样的一个整体性指标可对这种动物模型的“结合”作出最本质的反映。因此，笔者认为，深入改进该模型建立及评价体系，建立更加完善的UC脾肾阳虚型病证结合动物模型，已成为相关实验研究刻不容缓的任务。
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（收稿日期：2015-05-26）
（修回日期：2015-09-25；编辑：梅智胜）
