咳喘宁胶囊对稳期慢性阻塞性肺疾病患者气道炎症影响及疗效评价.pdf
孙杰+韩敏娟+张旭辉+等
摘要：目的 观察咳喘宁胶囊对慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期患者气道炎症细胞及炎性介质的影响。方法 采用随机数字表法将110例COPD稳定期患者随机分为治疗组和对照组各55例。2组均予复方异丙托溴铵溶液气雾吸入。同时，治疗组口服咳喘宁胶囊，每次4粒，每日3次；对照组口服等剂量安慰剂胶囊。疗程均为3个月。观察痰炎症细胞分类计数、血清及痰上清液中炎症因子水平。结果 治疗组治疗后痰中性粒细胞下降（P<0.05）、巨噬细胞增多（P<0.05），与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。2组治疗前后血清白细胞介素（IL）-6、IL-8、白三烯B4（LTB4）水平差异无统计学意义（P>0.05）；治疗组治疗后痰上清液IL-6、IL-8、LTB4水平均下降（P<0.05），与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 咳喘宁胶囊对稳定期COPD患者气道炎症细胞及炎性介质释放有明显的抑制作用。
关键词：咳喘宁胶囊；慢性阻塞性肺疾病；白细胞介素-6；白细胞介素-8；白三烯B4；随机对照试验
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.09.006
中图分类号：R259.63 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）09-0021-04
慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以持续气流受限为特征的疾病，且气流受限呈进行性发展。目前西医治
基金项目：甘肃省科技支撑计划（1011FKCA095）
疗稳定期COPD多以抗炎解痉平喘为主。咳喘宁胶囊具有扶正固本、化痰活血、止咳平喘之功效，对慢性支气管炎、COPD等有一定疗效。笔者采用随机、单盲、安慰剂平行对照临床试验方法，通过观察咳喘宁胶囊对COPD稳定期患者气道炎症细胞及炎性介质的影响，探讨其治疗COPD的作用机制，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 病例来源
110例纳入病例均为甘肃中医学院附属医院呼吸科2011年1月-2013年1月就诊的COPD稳定期患者。
1.2 诊断与纳入标准
①符合中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组制定的“慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2013年修订版）”[1]相关标准；②轻、中度稳定期COPD患者，临床稳定期被限定为4周内无急性发作和未改变治疗方案；③年龄>50岁，男女不限；④患者对治疗方案知情，并签署知情同意书。
1.3 排除标准
①活动性肺结核、肺癌、明显支气管扩张、尘肺及其他肺限制性通气功能障碍者；②合并心血管、神经、内分泌、血液、肝、肾等严重系统疾患和恶性肿瘤者；③不愿配合和完全不能交流者。
1.4 试验设计
本试验采用随机、单盲、安慰剂平行对照临床试验方法，单盲对象为受试者。试验中注意随机方法的隐藏，用SAS统计分析系统PROCPLAN过程语句，给定种子数，生成随机数字表，由与本试验无关的专人控制分配方案，按随机数字表将对应的分组代码装入信封。临床医生按顺序号依次纳入受试者时拆开信封，按其中的分组代码将受试者分入不同的处理组，每组55例。本研究经甘肃中医学院附属医院临床研究伦理委员会批准并备案。
1.5 治疗方法
2组患者均予复方异丙托溴铵溶液（商品名：可必特，每揿含异丙托溴铵20 μg、硫酸沙丁胺醇120 μg，上海勃林格殷格翰药业有限公司，批号937320），每次2揿，气雾吸入，每日4次。治疗组同时予咳喘宁胶囊（甘肃中医学院附属医院制剂中心，批号20110317， 0.5 g/粒），每次4粒，每日3次，口服。对照组同时予安慰剂胶囊（甘肃中医学院附属医院制剂中心提供，主要成分为淀粉，外形同咳喘宁胶囊），用法、用量同治疗组。连用3个月。观察期间出现急性发作，按“慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2013年修订版）”[1]中相关方案进行治疗。
1.6 观察指标与方法
1.6.1 痰标本的收集及处理 吸入沙丁胺醇气雾剂（葛兰素史克制药有限公司，批号 BB0031）200 μg， 10 min后超声雾化吸入3%高渗盐水，雾化量0.4 mL/min，雾化时间5～10 min。将痰置于无菌干燥的培养皿中，挑选出黏液部分放入无菌干燥试管中称重，加入4倍量0.1%二硫苏糖醇（DDT），37 ℃水浴15 min，以有效溶解痰液，再加入4倍量磷酸盐缓冲液（0.01 mmol/L， pH 7.4）充分洗涤细胞5 min，2000 r/min离心10 min，取上清液-70 ℃保存待测，沉淀留作痰细胞学检查。
1.6.2 痰细胞分类计数 制备痰细胞学涂片2～3张，油镜下观察2次不同涂片的视野中200个有核细胞，分类计数中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞及嗜酸性粒细胞，计算平均数，得出各种细胞所占百分率。
1.6.3 血清样本收集 采静脉血3～5 mL，2000 r/min离心15 min，抽取1 mL血清，-70 ℃保存待测。
1.6.4 痰上清液和血清炎性介质检测 白细胞介素（IL）-6、IL-8、白三烯B4（LTB4）采用双抗夹心酶联免疫吸附法测定。检测试剂盒由上海巧伊生物科技有限公司提供，批号 20130207。操作步骤按试剂盒说明书进行，采用美国BIO-RAD公司生产酶标仪测定。
1.6.5 安全性检查 用药前后检测肝、肾功能，观察咳喘宁胶囊不良反应。
1.7 统计学方法
采用SPSS17.0统计软件进行分析。计量资料以 —x±s描述，采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 一般资料
110例稳定期COPD患者中，因去外地生活和工作脱落5例，其中治疗组3例、对照组2例；中止试验3例，其中治疗组1例、对照组2例，患者分别在入院后5、7、11 d因感染中止试验；死亡1例，系治疗组，患者于二次住院时合并感染抢救无效死亡。因以上9例治疗未超过一半疗程，故未纳入统计，仅作原始数据和不良反应记录。最终纳入患者101例，治疗组50例，男34例，女16例，年龄62～78岁，病程3.5～17年；对照组51例，男37例，女14例，年龄64～79岁，病程4～15年。2组性别、年龄、病程比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
2.2 2组治疗前后痰液炎症细胞分类比较
排除诱导痰后部分无痰液患者，治疗组、对照组分别纳入35、34例进行统计。痰液炎症细胞分类比较结果见表1。
2.4 临床安全性评价
治疗组治疗后肝、肾功能指标未见明显异常变化（P>0.05），未见明显不良反应。
3 讨论
COPD患者肺内炎症细胞以肺泡巨噬细胞、中性粒细胞和CD8+T细胞为主。激活的炎症细胞释放多种炎性介质，其中IL-6、IL-8、LTB4是参与气道炎症的重要细胞因子。
中医认为，本病多因久病肺虚，痰饮内生，日久则痰浊、水饮、血瘀互相影响而发病。咳喘宁胶囊中烈香杜鹃为君药，以止咳、祛痰、平喘；黄芩、浙贝母、百部为臣药，其中黄芩苦寒善清肺热，浙贝母清热化痰止咳，百部润肺止咳，三药相伍既可清肺，又可润肺，配合君药，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪术破日久郁积之痰瘀；淫羊藿补肾壮阳，纳气平喘，固一身阳气之根本。诸药合用，共成扶正固本、活血化瘀、润肺止咳平喘之剂。针对COPD本虚标实、痰瘀互结的基本病机，以扶正祛邪，标本兼顾。
IL-6和IL-8是中性粒细胞和T淋巴细胞的重要趋化因子，可增加局部炎性细胞，从而促进甚至加重气道炎症反应，并在一定程度上反映气道炎症的严重程度。IL-6参与COPD的气道炎症和气道重塑，在高浓度时可损伤血管内皮细胞，促进免疫黏附，微血栓形成，造成肺损伤，还可延缓中性粒细胞凋亡，使中性粒细胞在炎症部位数量增多，释放超氧阴离子增多，加重炎症反应，最终引起小气道和肺泡组织结构和功能的改变。IL-8与中性粒细胞表面特异性受体结合，导致细胞变形反应、脱颗粒反应、呼吸爆发反应、释放溶酶体、形成超氧化物，从而促进炎症反应。研究表明，COPD患者痰中中性粒细胞数目与第1秒用力呼气容积呈负相关[2]，说明IL-8在一定程度上反映了COPD患者气流阻塞程度，并可作为估计气道炎症严重性以及COPD危险因素的指标。LTB4可募集活化中性粒细胞，使之生成过量炎性产物，扩大局部炎症反应[3]，参与COPD的发病。巨噬细胞作为调节COPD气道炎症和参与气道重构的靶细胞，对小气道和肺泡隔的炎症起了主要促进作用。巨噬细胞也可产生LTB4，而且其活性受白三烯的影响。LTB4作用于支气管管壁，使支气管平滑肌收缩，支气管管腔变窄，气道阻力明显增高，气管和支气管壁毛细血管通透性增加，渗出增多，蛋白质和水分漏出，引起黏膜水肿。
本研究表明，COPD患者气道炎性细胞及炎性介质水平增高，这与Wanner A等[4]的研究结果相符。现代药理研究表明，烈香杜鹃含有大量挥发油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛细血管渗透性达到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向浆液腺转化，减轻炎性细胞浸润程度，使管腔内容物减少，有利于炎症吸收和上皮功能恢复[6]；黄芩甲醇提取物可通过抑制免疫细胞的功能及促炎因子的产生而发挥抗炎作用[7]，浙贝母有效成分浙贝甲素和浙贝乙素对卡巴胆碱引起的豚鼠离体气管条收缩有明显抑制作用[8]，提示浙贝母很可能是通过作用于气管壁M受体舒张气管。本研究显示，治疗组气道痰炎症细胞分类计数及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差异有统计学意义（P<0.05， P<0.01），表明咳喘宁胶囊能抑制COPD稳定期患者气道炎症细胞及炎症介质的释放，从而减少中性粒细胞在气管内募集，减轻COPD患者的气道慢性炎症。
参考文献：
[1] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2013年修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2013，36（4）：255- 264.
[2] Yamamoto C， yoneda T， Yoshikawa M， et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8[J]. C beast， 1997，112：125-128.
[3] Crooks SW， Stockley RA. Leukotriene B4[J]. Int J Biocliem Cell Biol，1998，30：173-178.
[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
2.2 2组治疗前后痰液炎症细胞分类比较
排除诱导痰后部分无痰液患者，治疗组、对照组分别纳入35、34例进行统计。痰液炎症细胞分类比较结果见表1。
2.4 临床安全性评价
治疗组治疗后肝、肾功能指标未见明显异常变化（P>0.05），未见明显不良反应。
3 讨论
COPD患者肺内炎症细胞以肺泡巨噬细胞、中性粒细胞和CD8+T细胞为主。激活的炎症细胞释放多种炎性介质，其中IL-6、IL-8、LTB4是参与气道炎症的重要细胞因子。
中医认为，本病多因久病肺虚，痰饮内生，日久则痰浊、水饮、血瘀互相影响而发病。咳喘宁胶囊中烈香杜鹃为君药，以止咳、祛痰、平喘；黄芩、浙贝母、百部为臣药，其中黄芩苦寒善清肺热，浙贝母清热化痰止咳，百部润肺止咳，三药相伍既可清肺，又可润肺，配合君药，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪术破日久郁积之痰瘀；淫羊藿补肾壮阳，纳气平喘，固一身阳气之根本。诸药合用，共成扶正固本、活血化瘀、润肺止咳平喘之剂。针对COPD本虚标实、痰瘀互结的基本病机，以扶正祛邪，标本兼顾。
IL-6和IL-8是中性粒细胞和T淋巴细胞的重要趋化因子，可增加局部炎性细胞，从而促进甚至加重气道炎症反应，并在一定程度上反映气道炎症的严重程度。IL-6参与COPD的气道炎症和气道重塑，在高浓度时可损伤血管内皮细胞，促进免疫黏附，微血栓形成，造成肺损伤，还可延缓中性粒细胞凋亡，使中性粒细胞在炎症部位数量增多，释放超氧阴离子增多，加重炎症反应，最终引起小气道和肺泡组织结构和功能的改变。IL-8与中性粒细胞表面特异性受体结合，导致细胞变形反应、脱颗粒反应、呼吸爆发反应、释放溶酶体、形成超氧化物，从而促进炎症反应。研究表明，COPD患者痰中中性粒细胞数目与第1秒用力呼气容积呈负相关[2]，说明IL-8在一定程度上反映了COPD患者气流阻塞程度，并可作为估计气道炎症严重性以及COPD危险因素的指标。LTB4可募集活化中性粒细胞，使之生成过量炎性产物，扩大局部炎症反应[3]，参与COPD的发病。巨噬细胞作为调节COPD气道炎症和参与气道重构的靶细胞，对小气道和肺泡隔的炎症起了主要促进作用。巨噬细胞也可产生LTB4，而且其活性受白三烯的影响。LTB4作用于支气管管壁，使支气管平滑肌收缩，支气管管腔变窄，气道阻力明显增高，气管和支气管壁毛细血管通透性增加，渗出增多，蛋白质和水分漏出，引起黏膜水肿。
本研究表明，COPD患者气道炎性细胞及炎性介质水平增高，这与Wanner A等[4]的研究结果相符。现代药理研究表明，烈香杜鹃含有大量挥发油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛细血管渗透性达到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向浆液腺转化，减轻炎性细胞浸润程度，使管腔内容物减少，有利于炎症吸收和上皮功能恢复[6]；黄芩甲醇提取物可通过抑制免疫细胞的功能及促炎因子的产生而发挥抗炎作用[7]，浙贝母有效成分浙贝甲素和浙贝乙素对卡巴胆碱引起的豚鼠离体气管条收缩有明显抑制作用[8]，提示浙贝母很可能是通过作用于气管壁M受体舒张气管。本研究显示，治疗组气道痰炎症细胞分类计数及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差异有统计学意义（P<0.05， P<0.01），表明咳喘宁胶囊能抑制COPD稳定期患者气道炎症细胞及炎症介质的释放，从而减少中性粒细胞在气管内募集，减轻COPD患者的气道慢性炎症。
参考文献：
[1] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2013年修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2013，36（4）：255- 264.
[2] Yamamoto C， yoneda T， Yoshikawa M， et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8[J]. C beast， 1997，112：125-128.
[3] Crooks SW， Stockley RA. Leukotriene B4[J]. Int J Biocliem Cell Biol，1998，30：173-178.
[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
2.2 2组治疗前后痰液炎症细胞分类比较
排除诱导痰后部分无痰液患者，治疗组、对照组分别纳入35、34例进行统计。痰液炎症细胞分类比较结果见表1。
2.4 临床安全性评价
治疗组治疗后肝、肾功能指标未见明显异常变化（P>0.05），未见明显不良反应。
3 讨论
COPD患者肺内炎症细胞以肺泡巨噬细胞、中性粒细胞和CD8+T细胞为主。激活的炎症细胞释放多种炎性介质，其中IL-6、IL-8、LTB4是参与气道炎症的重要细胞因子。
中医认为，本病多因久病肺虚，痰饮内生，日久则痰浊、水饮、血瘀互相影响而发病。咳喘宁胶囊中烈香杜鹃为君药，以止咳、祛痰、平喘；黄芩、浙贝母、百部为臣药，其中黄芩苦寒善清肺热，浙贝母清热化痰止咳，百部润肺止咳，三药相伍既可清肺，又可润肺，配合君药，共奏止咳、祛痰、平喘之功；佐以莪术破日久郁积之痰瘀；淫羊藿补肾壮阳，纳气平喘，固一身阳气之根本。诸药合用，共成扶正固本、活血化瘀、润肺止咳平喘之剂。针对COPD本虚标实、痰瘀互结的基本病机，以扶正祛邪，标本兼顾。
IL-6和IL-8是中性粒细胞和T淋巴细胞的重要趋化因子，可增加局部炎性细胞，从而促进甚至加重气道炎症反应，并在一定程度上反映气道炎症的严重程度。IL-6参与COPD的气道炎症和气道重塑，在高浓度时可损伤血管内皮细胞，促进免疫黏附，微血栓形成，造成肺损伤，还可延缓中性粒细胞凋亡，使中性粒细胞在炎症部位数量增多，释放超氧阴离子增多，加重炎症反应，最终引起小气道和肺泡组织结构和功能的改变。IL-8与中性粒细胞表面特异性受体结合，导致细胞变形反应、脱颗粒反应、呼吸爆发反应、释放溶酶体、形成超氧化物，从而促进炎症反应。研究表明，COPD患者痰中中性粒细胞数目与第1秒用力呼气容积呈负相关[2]，说明IL-8在一定程度上反映了COPD患者气流阻塞程度，并可作为估计气道炎症严重性以及COPD危险因素的指标。LTB4可募集活化中性粒细胞，使之生成过量炎性产物，扩大局部炎症反应[3]，参与COPD的发病。巨噬细胞作为调节COPD气道炎症和参与气道重构的靶细胞，对小气道和肺泡隔的炎症起了主要促进作用。巨噬细胞也可产生LTB4，而且其活性受白三烯的影响。LTB4作用于支气管管壁，使支气管平滑肌收缩，支气管管腔变窄，气道阻力明显增高，气管和支气管壁毛细血管通透性增加，渗出增多，蛋白质和水分漏出，引起黏膜水肿。
本研究表明，COPD患者气道炎性细胞及炎性介质水平增高，这与Wanner A等[4]的研究结果相符。现代药理研究表明，烈香杜鹃含有大量挥发油，能直接作用于呼吸道黏膜，降低黏膜毛细血管渗透性达到祛痰的作用[5]，并有利于黏液腺向浆液腺转化，减轻炎性细胞浸润程度，使管腔内容物减少，有利于炎症吸收和上皮功能恢复[6]；黄芩甲醇提取物可通过抑制免疫细胞的功能及促炎因子的产生而发挥抗炎作用[7]，浙贝母有效成分浙贝甲素和浙贝乙素对卡巴胆碱引起的豚鼠离体气管条收缩有明显抑制作用[8]，提示浙贝母很可能是通过作用于气管壁M受体舒张气管。本研究显示，治疗组气道痰炎症细胞分类计数及痰上清液IL-6、IL-8和LTB4含量差异有统计学意义（P<0.05， P<0.01），表明咳喘宁胶囊能抑制COPD稳定期患者气道炎症细胞及炎症介质的释放，从而减少中性粒细胞在气管内募集，减轻COPD患者的气道慢性炎症。
参考文献：
[1] 中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2013年修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2013，36（4）：255- 264.
[2] Yamamoto C， yoneda T， Yoshikawa M， et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8[J]. C beast， 1997，112：125-128.
[3] Crooks SW， Stockley RA. Leukotriene B4[J]. Int J Biocliem Cell Biol，1998，30：173-178.
[4] Wanner A， Boushey H， Lee TH， et al. Inflammationonic in chronic obstructive pulmonary disease：Proceedings from the Transatlantic
