李晓东+李娟+郭敏+等
摘要：目的 比较甘青青兰生品和炒制品中总黄酮、总多酚含量的差异及其清除2，2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）自由基能力，探讨生、炒甘青青兰中有效成分含量和抗氧化活性之间的关系。方法 分别以75%乙醇为溶媒采用冷浸法对甘青青兰生品和炒制品进行提取，采用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法和Folin-Ciocalteu法分别测定其提取物中总黄酮和总多酚含量，采用DPPH自由基清除法评价其提取物的抗氧化能力。结果 甘青青兰生品中总黄酮含量（6.442%）<炒制品（7.929%）；甘青青兰生品中总多酚含量（4.132%）≈炒制品（4.136%）；甘青青兰生品自由基半数清除率浓度（0.847）>炒制品（0.628），甘青青兰生品自由基清除效率（1181.335）<炒制品（1592.357）。结论 甘青青兰抗氧化活性成分可能为酚酸类和黄酮类化合物，其总黄酮和总多酚含量与其抗氧化活性有一定相关性。
关键词：甘青青兰；总黄酮；总多酚；2，2-二苯基-1-苦肼基；自由基清除能力
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.09.023
中图分类号：R284.1；R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）09-0080-04
Comparison Study on Contents of Total Flavonoids， Total Polyphenol and DPPH Free Radical Scavenging Activities of Dracocephalum tanguticum Maxim Before and After Roasted LI Xiao-dong1，2， LI Juan3， GUO Min2， JIANG Hua2 （1.Institute of Chinese Materia Medica， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China；2.Gansu Academy of Traditional Chinese Medicine， Lanzhou 730050， China；3.The People's Hospital in Gansu Province， Lanzhou 730000， China）
Abstract：Objective To compare the content difference of total flavonoid， total polyphenol and scavenging activity to DPPH free radical of Dracocephalum tanguticum Maxim （DtM） before and after roasted；To explore the relationship between the contents of active components and antioxidant activity in the DtM before and after roasted. Methods The crude and roasted DtM were extracted with 75% ethanol as the solvent. The contents of total flavonoid and total polyphenol were detected by NaNO2-Al （NO3）3-NaOH and Folin-ciocalteu methods， respectively. The antioxidant abilities were evaluated by 2， 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl （DPPH） free radical scavenging activity. Results The content of total flavonoids in the crude DtM （6.442%） Key words：Dracocephalum tanguticum Maxim；total flavonoid；total polyphenol；DPPH；scavenging activity to free radical 甘青青兰Dracocephalum tanguticum Maxim又名唐古特青兰，藏语称“知羊格”，主产于我国西藏东 基金项目：甘肃省青年科技基金计划（1208RJYA035）
部、青海、甘肃西南部及四川西部，为唇形科植物，以干燥全草或花入药，是藏药常用药材之一。藏医用其治疗肝热病、胃热病、黄水病、便血、疮疡不愈等症[1-2]。我国藏药20余种成方制剂中均使用了甘青青兰，且其在不同成方中所起的作用不完全相同[3-4]。
甘青青兰化学成分研究表明，其活性成分以黄酮类化合物（如胡麻素、芹菜素等）、三萜类化合物（如齐墩果酸、熊果酸等）、挥发油类化合物（如桉油醇、甲基环戊烷、桉叶油素等）、多糖、酚酸类成分为主，具有抑菌、抗缺氧和抗病毒等药理作用[4-8]。本试验以甘青青兰生品和炒制品75%乙醇提取物为研究对象，以芦丁和没食子酸为对照品，分别采用NaNO2-Al（NO3）3- NaOH法和Folin-Ciocalteu法，测定各粗提取物总黄酮和总多酚含量，并以2，2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）自由基清除法评价其不同提取物的抗氧化能力，旨在探讨其主要有效成分与抗氧化活性的相关性。
1 仪器与试药
UV-1800紫外可见分光光度计，日本岛津公司；CP225D电子天平，赛多利斯公司；R1002旋转蒸发仪，河南巩义予华仪器设备有限公司；H165台式高速离心机，长沙平凡仪器仪表有限公司；FW400A高速万能粉碎机，北京中兴伟业仪器有限公司；SB-5200DTN超声波清洗器，宁波新芝生物科技有限公司。
甘青青兰药材，购自奇正集团甘南佛阁藏药有限公司，经甘肃中医学院中药生药学教研室张西玲教授鉴定为正品；芦丁对照品（批号100080-200707）、没食子酸对照品（批号110831-200302），购自中国药品生物制品检定所；2N Folin-Ciocalteu试剂、DPPH，购自美国Sigma公司；甲醇、无水乙醇、碳酸氢钠、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠均为分析纯；试验用水为去离子水。
2 统计学方法
采用SPSS18.0统计软件进行分析。数据均用—x±s表示，组间比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
3 试验方法与结果
3.1 总黄酮和总多酚含量测定
3.1.1 供试品及供试品溶液的制备 甘青青兰生品和炒制品各100 g，分别用万能粉碎机磨成粉，混合均匀，用75%乙醇溶液按料液体积比1∶10在室温下浸提3次，每次7 d，过滤，取上清液，合并减压浓缩，干浸膏作为供试品备用。分别精密称取供试品25.0 mg，置25 mL容量瓶中，加入蒸馏水，超声（功率200 W，频率40 kHz）至完全溶解，摇匀，即得浓度为1.0 mg/mL的供试品溶液。
3.1.2 对照品溶液的制备 精密称取105 ℃干燥至恒重的芦丁对照品10.0 mg，用65%乙醇溶解并定容至50 mL容量瓶中，摇匀，即得浓度为0.2 mg/mL的芦丁对照品溶液，置于棕色瓶中待用。精密称取105 ℃干燥至恒重的没食子酸对照品10.0 mg，置100 mL量瓶中，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.1 mg/mL的没食子酸对照品溶液，置棕色瓶中待用。
3.1.3 标准曲线的绘制 准确吸取芦丁对照品溶液0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56 mL，分别置于25 mL容量瓶中，各加65%乙醇6 mL，加5%NaNO2溶液1 mL，放置6 min，加入10%Al（NO3）3溶液1 mL，放置6 min，再加入4%NaOH溶液10 mL，用65%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15 min，在510 nm波长处测定吸光度，每个浓度重复3次，取平均值[9-11]。以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程A=0.506C+0.037 （r2=0.999），芦丁的线性范围为0.08～2.56 mg/mL。
精确吸取没食子酸对照品溶液0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32 mL于10 mL容量瓶中，各加蒸馏水6 mL，摇匀，再加0.5 mL 2N Folin-Ciocalteu，充分摇匀，1 min之后加20% Na2CO3溶液1.5 mL，混匀，用蒸馏水定容至刻度，于30 ℃水浴中恒温1.5 h，自然冷却至室温（75 ℃水浴中恒温10 min，室温下避光放置2 h），以相应试剂为空白，在760 nm波长处测定吸光度，每个浓度重复3次，取平均值，以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程A=14.318C+0.069 9（r2=0.999），线性范围为0.01～0.32 mg/mL。
3.1.4 精密性试验 精密量取6份芦丁对照品储备液2 mL于25 mL容量瓶中、6份没食子酸对照品储备液0.2 mL于10 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，计算得到总黄酮对照品和总多酚对照品含量的RSD分别为0.21%、0.15%，表明该方法测定总黄酮和总多酚含量，仪器精密度良好。
3.1.5 稳定性试验 精密量取1 mg/mL供试品溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中，0.2 mL于10 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，分别于0、10、20、30、40、50、60 min测定吸光度，计算得到甘青青兰生品和炒制品总黄酮含量的RSD分别为0.42%、0.30%，总多酚含量的RSD分别为0.09%、0.22%，表明供试品溶液在60 min内显色稳定。
3.1.6 重复性试验 分别精密量取6份供试品溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中、0.2 mL于10 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，计算得到甘青青兰生品和炒制品总黄酮含量的RSD分别为0.54%、0.48%，总多酚含量的RSD分别为0.09%、0.22%，表明本方法重复性良好。
3.1.7 加样回收率试验 精密量取同一批供试品溶液9份，分成3组，分别精密加入已知含量芦丁和没食子酸对照品溶液1.0、1.5、2.0 mL，分别按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，重复3次，计算甘青青兰生品和炒制品总黄酮和总多酚含量
3.1.8 样品含量测定 分别准确吸取供试品溶液1.0 mL，分别置于25 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，分别计算其中总黄酮和总多酚的含量
3.2 2，2-二苯基-1-苦肼基自由基清除能力测定
3.2.1 样品溶液的制备 精密称取甘青青兰生品和炒制品提取物各0.050 1 g，用甲醇溶解，定容至50 mL，即得。
3.2.2 2，2-二苯基-1-苦肼基溶液的配制 精密称取DPPH 0.020 2 g，加甲醇溶解，定容至50 mL，作为储备液。精密移取上述储备液10 mL至100 mL量瓶中，定容，得40.4 mg/L的储备液，备用。
3.2.3 对照品溶液的制备 精密称取2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）甲醇溶液与维生素C水溶液，分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度溶液。
3.2.4 标准曲线的绘制 分别精密移取DPPH储备液0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mL于7个10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇溶剂为参比，在一定波长处测定各溶液的吸光度。以DPPH质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程A=0.015C+0.036（r2=0.999），线性范围为5.2～31.2 mg/L。
3.2.5 自由基清除率测定 样品溶液分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度的供试液。分别取不同浓度供试液0.2 mL及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL加入同一具塞试管中，摇匀。40 min后用95%乙醇溶液作参比，测其在517 nm波长的吸光度Ai，同时测量0.2 mL供试液与7.8 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Aj，以及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL与0.2 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Ac。根据公式计算自由基清除率（SR），SR（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%。所有试验重复3次。用同样方法测定对照品维生素C水溶液与BHT甲醇溶液的SR[12-13]。
3.2.6 自由基清除效率测定 SR在15%～75%范围内，该值与样品浓度有很好的线性关系，但超过此范围时，SR不随样品浓度的增加而增加，因此对SR值超过50%的样品需进一步采用自由基清除效率（SE）来评估其抗氧化活性。按公式SE=1000/IC50计算（IC50指SR为50%时的样品溶液浓度）[12-13]。3 讨论
本试验以芦丁和没食子酸为对照品，采用显色反应稳定的NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法和Folin-Ciocalteu法测定甘青青兰生品和炒制品乙醇提取物的总黄酮、总多酚含量。结果显示，甘青青兰生品中总黄酮含量（6.442%）<甘青青兰炒制品（7.929%），甘青青兰生品中总多酚含量（4.132%）≈甘青青兰炒制品（4.136%）。说明甘青青兰生品和炒制品中总黄酮含量差异显著，而总多酚含量基本接近。
本试验采用提取物与稳定自由基DPPH反应的分析方法，计算提取物对DPPH自由基的清除活性，从而进一步得知各样品的抗氧化活性。结果显示，IC50甘青青兰生品>甘青青兰炒制品>BHT>维生素C，SE甘青青兰生品<甘青青兰炒制品 本试验比较了甘青青兰生品和炒制品中总黄酮、总多酚含量及DPPH自由基清除能力，发现甘青青兰炒制品乙醇提取物的总黄酮含量高于其生品乙醇提取物，而总多酚含量两者基本相等。同时，前者的DPPH自由基清除能力高于后者，说明甘青青兰中总黄酮和总多酚含量与其抗氧化活性正相关，其具体量效关系和组分确定有待进一步研究。 参考文献： [1] 青海省药品检验所，青海省藏医药研究所.中国藏药：第一卷[M].上海：上海科学技术出版社，1996：260-263. [2] 王宝勤.国家藏药标准全书[M].北京：中华医学电子音像出版社，2004：160-163. [3] 周雪杉，曹雨虹，宋良科，等.藏药甘青青兰与藏荆芥的生药鉴别研究[J].现代中药研究与实践，2013，27（3）：17-19. [4] 贠田.唐古特青兰抗菌、抗病毒活性以及有效部位研究[D].兰州：兰州大学，2008. [5] 沈杰，叶蕴华，周亚伟.藏药甘青青兰的生物活性成分研究[J].中国药学杂志，2009，44（3）：170-175. [6] 廖敬礼，顾健，钟锋，等.藏药唐古特青兰的研究进展[J].中国民族民间医药，2010，19（11）：9-10. [7] 薛世萍，姜华，杨丽霞，等.藏药甘青青兰的药学研究进展[J].中国中医药信息杂志，2010，17（9）：111-112. [8] 庆易微，热增才旦.不同提取方法研究甘青青兰中多糖含量[J].安徽农业科学，2009，37（26）：12552，12562. [9] 袁苏宁，杜卫军，刘丛，等.不同来源薰衣草中总黄酮及总多酚含量测定研究[J].环球中医药，2012，5（9）：641-644. [10] 廉美娜，朱玉环，徐长林，等.祁连山东段高寒草甸植物总酚和黄酮含量及抗氧化活性研究[J].西北植物学报，2012，32（12）：2492-2497. [11] 倪勤学，刘颖坤，龚凌霄，等.6种地被竹叶有效成分及其抗氧化活性研究[J].中草药，2011，42（11）：2317-2321. [12] Jiang H， Zhan WQ， Liu X， et al. Antioxidant activities of extracts and flavonoid compounds from Oxytropis falcate Bunge.[J]. Nat Prod Res，2008，22（18）：1650-1566. [13] Wen Xin-Bao， Miao Fang， Zhou Le， et al. In vitro antioxidant activity of Parnassia wightiana W. extracts[J]. Chinese Journal of Natural Medicines，2012，10（3）：190-195. （收稿日期：2014-01-03；编辑：陈静）
3.1.8 样品含量测定 分别准确吸取供试品溶液1.0 mL，分别置于25 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，分别计算其中总黄酮和总多酚的含量
3.2 2，2-二苯基-1-苦肼基自由基清除能力测定
3.2.1 样品溶液的制备 精密称取甘青青兰生品和炒制品提取物各0.050 1 g，用甲醇溶解，定容至50 mL，即得。
3.2.2 2，2-二苯基-1-苦肼基溶液的配制 精密称取DPPH 0.020 2 g，加甲醇溶解，定容至50 mL，作为储备液。精密移取上述储备液10 mL至100 mL量瓶中，定容，得40.4 mg/L的储备液，备用。
3.2.3 对照品溶液的制备 精密称取2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）甲醇溶液与维生素C水溶液，分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度溶液。
3.2.4 标准曲线的绘制 分别精密移取DPPH储备液0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mL于7个10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇溶剂为参比，在一定波长处测定各溶液的吸光度。以DPPH质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程A=0.015C+0.036（r2=0.999），线性范围为5.2～31.2 mg/L。
3.2.5 自由基清除率测定 样品溶液分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度的供试液。分别取不同浓度供试液0.2 mL及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL加入同一具塞试管中，摇匀。40 min后用95%乙醇溶液作参比，测其在517 nm波长的吸光度Ai，同时测量0.2 mL供试液与7.8 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Aj，以及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL与0.2 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Ac。根据公式计算自由基清除率（SR），SR（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%。所有试验重复3次。用同样方法测定对照品维生素C水溶液与BHT甲醇溶液的SR[12-13]。
3.2.6 自由基清除效率测定 SR在15%～75%范围内，该值与样品浓度有很好的线性关系，但超过此范围时，SR不随样品浓度的增加而增加，因此对SR值超过50%的样品需进一步采用自由基清除效率（SE）来评估其抗氧化活性。按公式SE=1000/IC50计算（IC50指SR为50%时的样品溶液浓度）[12-13]。3 讨论
本试验以芦丁和没食子酸为对照品，采用显色反应稳定的NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法和Folin-Ciocalteu法测定甘青青兰生品和炒制品乙醇提取物的总黄酮、总多酚含量。结果显示，甘青青兰生品中总黄酮含量（6.442%）<甘青青兰炒制品（7.929%），甘青青兰生品中总多酚含量（4.132%）≈甘青青兰炒制品（4.136%）。说明甘青青兰生品和炒制品中总黄酮含量差异显著，而总多酚含量基本接近。
本试验采用提取物与稳定自由基DPPH反应的分析方法，计算提取物对DPPH自由基的清除活性，从而进一步得知各样品的抗氧化活性。结果显示，IC50甘青青兰生品>甘青青兰炒制品>BHT>维生素C，SE甘青青兰生品<甘青青兰炒制品 本试验比较了甘青青兰生品和炒制品中总黄酮、总多酚含量及DPPH自由基清除能力，发现甘青青兰炒制品乙醇提取物的总黄酮含量高于其生品乙醇提取物，而总多酚含量两者基本相等。同时，前者的DPPH自由基清除能力高于后者，说明甘青青兰中总黄酮和总多酚含量与其抗氧化活性正相关，其具体量效关系和组分确定有待进一步研究。 参考文献： [1] 青海省药品检验所，青海省藏医药研究所.中国藏药：第一卷[M].上海：上海科学技术出版社，1996：260-263. [2] 王宝勤.国家藏药标准全书[M].北京：中华医学电子音像出版社，2004：160-163. [3] 周雪杉，曹雨虹，宋良科，等.藏药甘青青兰与藏荆芥的生药鉴别研究[J].现代中药研究与实践，2013，27（3）：17-19. [4] 贠田.唐古特青兰抗菌、抗病毒活性以及有效部位研究[D].兰州：兰州大学，2008. [5] 沈杰，叶蕴华，周亚伟.藏药甘青青兰的生物活性成分研究[J].中国药学杂志，2009，44（3）：170-175. [6] 廖敬礼，顾健，钟锋，等.藏药唐古特青兰的研究进展[J].中国民族民间医药，2010，19（11）：9-10. [7] 薛世萍，姜华，杨丽霞，等.藏药甘青青兰的药学研究进展[J].中国中医药信息杂志，2010，17（9）：111-112. [8] 庆易微，热增才旦.不同提取方法研究甘青青兰中多糖含量[J].安徽农业科学，2009，37（26）：12552，12562. [9] 袁苏宁，杜卫军，刘丛，等.不同来源薰衣草中总黄酮及总多酚含量测定研究[J].环球中医药，2012，5（9）：641-644. [10] 廉美娜，朱玉环，徐长林，等.祁连山东段高寒草甸植物总酚和黄酮含量及抗氧化活性研究[J].西北植物学报，2012，32（12）：2492-2497. [11] 倪勤学，刘颖坤，龚凌霄，等.6种地被竹叶有效成分及其抗氧化活性研究[J].中草药，2011，42（11）：2317-2321. [12] Jiang H， Zhan WQ， Liu X， et al. Antioxidant activities of extracts and flavonoid compounds from Oxytropis falcate Bunge.[J]. Nat Prod Res，2008，22（18）：1650-1566. [13] Wen Xin-Bao， Miao Fang， Zhou Le， et al. In vitro antioxidant activity of Parnassia wightiana W. extracts[J]. Chinese Journal of Natural Medicines，2012，10（3）：190-195. （收稿日期：2014-01-03；编辑：陈静）
3.1.8 样品含量测定 分别准确吸取供试品溶液1.0 mL，分别置于25 mL容量瓶中，按“3.1.3”项下方法操作，测定吸光度，分别计算其中总黄酮和总多酚的含量
3.2 2，2-二苯基-1-苦肼基自由基清除能力测定
3.2.1 样品溶液的制备 精密称取甘青青兰生品和炒制品提取物各0.050 1 g，用甲醇溶解，定容至50 mL，即得。
3.2.2 2，2-二苯基-1-苦肼基溶液的配制 精密称取DPPH 0.020 2 g，加甲醇溶解，定容至50 mL，作为储备液。精密移取上述储备液10 mL至100 mL量瓶中，定容，得40.4 mg/L的储备液，备用。
3.2.3 对照品溶液的制备 精密称取2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）甲醇溶液与维生素C水溶液，分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度溶液。
3.2.4 标准曲线的绘制 分别精密移取DPPH储备液0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mL于7个10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，以甲醇溶剂为参比，在一定波长处测定各溶液的吸光度。以DPPH质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程A=0.015C+0.036（r2=0.999），线性范围为5.2～31.2 mg/L。
3.2.5 自由基清除率测定 样品溶液分别用乙醇溶解，均配置成10份不同浓度的供试液。分别取不同浓度供试液0.2 mL及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL加入同一具塞试管中，摇匀。40 min后用95%乙醇溶液作参比，测其在517 nm波长的吸光度Ai，同时测量0.2 mL供试液与7.8 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Aj，以及25 mg/L DPPH溶液7.8 mL与0.2 mL 95%乙醇溶液混合后的吸光度Ac。根据公式计算自由基清除率（SR），SR（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%。所有试验重复3次。用同样方法测定对照品维生素C水溶液与BHT甲醇溶液的SR[12-13]。
3.2.6 自由基清除效率测定 SR在15%～75%范围内，该值与样品浓度有很好的线性关系，但超过此范围时，SR不随样品浓度的增加而增加，因此对SR值超过50%的样品需进一步采用自由基清除效率（SE）来评估其抗氧化活性。按公式SE=1000/IC50计算（IC50指SR为50%时的样品溶液浓度）[12-13]。3 讨论
本试验以芦丁和没食子酸为对照品，采用显色反应稳定的NaNO2-Al（NO3）3-NaOH法和Folin-Ciocalteu法测定甘青青兰生品和炒制品乙醇提取物的总黄酮、总多酚含量。结果显示，甘青青兰生品中总黄酮含量（6.442%）<甘青青兰炒制品（7.929%），甘青青兰生品中总多酚含量（4.132%）≈甘青青兰炒制品（4.136%）。说明甘青青兰生品和炒制品中总黄酮含量差异显著，而总多酚含量基本接近。
本试验采用提取物与稳定自由基DPPH反应的分析方法，计算提取物对DPPH自由基的清除活性，从而进一步得知各样品的抗氧化活性。结果显示，IC50甘青青兰生品>甘青青兰炒制品>BHT>维生素C，SE甘青青兰生品<甘青青兰炒制品 本试验比较了甘青青兰生品和炒制品中总黄酮、总多酚含量及DPPH自由基清除能力，发现甘青青兰炒制品乙醇提取物的总黄酮含量高于其生品乙醇提取物，而总多酚含量两者基本相等。同时，前者的DPPH自由基清除能力高于后者，说明甘青青兰中总黄酮和总多酚含量与其抗氧化活性正相关，其具体量效关系和组分确定有待进一步研究。 参考文献： [1] 青海省药品检验所，青海省藏医药研究所.中国藏药：第一卷[M].上海：上海科学技术出版社，1996：260-263. [2] 王宝勤.国家藏药标准全书[M].北京：中华医学电子音像出版社，2004：160-163. [3] 周雪杉，曹雨虹，宋良科，等.藏药甘青青兰与藏荆芥的生药鉴别研究[J].现代中药研究与实践，2013，27（3）：17-19. [4] 贠田.唐古特青兰抗菌、抗病毒活性以及有效部位研究[D].兰州：兰州大学，2008. [5] 沈杰，叶蕴华，周亚伟.藏药甘青青兰的生物活性成分研究[J].中国药学杂志，2009，44（3）：170-175. [6] 廖敬礼，顾健，钟锋，等.藏药唐古特青兰的研究进展[J].中国民族民间医药，2010，19（11）：9-10. [7] 薛世萍，姜华，杨丽霞，等.藏药甘青青兰的药学研究进展[J].中国中医药信息杂志，2010，17（9）：111-112. [8] 庆易微，热增才旦.不同提取方法研究甘青青兰中多糖含量[J].安徽农业科学，2009，37（26）：12552，12562. [9] 袁苏宁，杜卫军，刘丛，等.不同来源薰衣草中总黄酮及总多酚含量测定研究[J].环球中医药，2012，5（9）：641-644. [10] 廉美娜，朱玉环，徐长林，等.祁连山东段高寒草甸植物总酚和黄酮含量及抗氧化活性研究[J].西北植物学报，2012，32（12）：2492-2497. [11] 倪勤学，刘颖坤，龚凌霄，等.6种地被竹叶有效成分及其抗氧化活性研究[J].中草药，2011，42（11）：2317-2321. [12] Jiang H， Zhan WQ， Liu X， et al. Antioxidant activities of extracts and flavonoid compounds from Oxytropis falcate Bunge.[J]. Nat Prod Res，2008，22（18）：1650-1566. [13] Wen Xin-Bao， Miao Fang， Zhou Le， et al. In vitro antioxidant activity of Parnassia wightiana W. extracts[J]. Chinese Journal of Natural Medicines，2012，10（3）：190-195. （收稿日期：2014-01-03；编辑：陈静）
